Fagocitna aktivnost dendritične stanice. Imunofenotip od dendritičke stanice

dendritičke stanice, dobivene iz stanica koštane srži miševa testirani su za sposobnost fagocitoze. Fagocitne aktivnost DC na različitim stupnjevima diferencijacije, aktivirani Immunovac-PE-4, kao i klasične induktor ACO sazrijevanja TNF-a, bio je procijenjen za upijanje protiv sojeva S. aureus i S. typhimurium. Kao kontrola, korišteni su makrofagi koji se pripremiti od istih stanica koštane srži ih uzgajanja s GM-CSF, tijekom 7 dana.
Nezrele dendritičke stanice aktivno fagocitoziraju bakterije razliku DC pomiješa Immunovac-VP-4, ACO i TNF-a.

Fagocitne aktivnost makrofaga i dendritičnih stanica je ispitivana dinamike protiv S. aureus i S. typhimurium.
Najaktivniji su makrofagi, fagocitna indeks ih u odnosu na S. aureus nakon 30 min inkubacije je 86,0 ± 4,8% i ostaje na visokoj razini kroz tri sata promatranje.

fagocitna aktivnost nezreo DC stimulirana i imunomodulatori mikrobiološkog porijekla bili značajno različiti.
Kada se dodaju na srijeda kultiviranje TNF-a ili Immunovac-VI-4 (skupine 2 i 3), fagocitna aktivnost bila je značajno niža, uz dodatak Immunovac-VP-4 indeks makrofagnog bila je nešto veća nego u slučaju pod utjecajem DC sazrijevanja TNF-a. Pod utjecajem SOA također su zabilježili pad fagocitoze DC, ali njegova razina je viša od Immunovac-VP-4, što može ukazivati ​​na prisutnost u kulturi nezrele DC i makrofagi. Uspoređujući stupanj fagocitozu S. aureus i S. TY-phimurium značajne razlike pronađene su.

dobro vjerojatno, da je veći aktivnost dendritskih stanica stimuliranih apsorpcijskim bakterije Immunovac-VP-4 i ACO ekspresije uslijed Toll-like receptora na DC i makrofagi koji imaju afinitet za patogena povezane strukture bakterija. Nakon reakcije s bakterijskim proizvodima, DC prenesena u novu funkcionalnu državu, što se odražava u smanjenju makrofagnog aktivnost i sposobnost da se snažnije prezentaciji antigena u usporedbi s makrofagima.

studija immunophenotypic karakteristike dendričnih stanica u različitim fazama sazrijevanja su provedena pomoću flyuorestseinizotiotsianat i PE-obilježenim monoklonskih protutijela tvrtku, USA «Caltag».

Stupanj diferencijacije i zrelih dendritičkih stanica, izvedene iz jetrenih stanica embrija miša određena je promjenom razine ekspresije za diferencijaciju molekula CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, MHC I, MHC II nakon 3 dana nakon toga nezrelim dendritičke stanice Immunovac-VP-4, bakterijski lizat K. pneumoniae, ili TNF-a.

nalazi predstava da TNF-a i Immunovac-VP-4 u ispitivanim koncentracijama stimuliranih DC sazrijevanja. Međutim, sudeći prema ekspresije markera diferencijacije, TNF-a aktivirani DC sazrijevanja u većoj mjeri nego Immunovac-VP-4 i lizata K. pneumoniae. Koncentracija 25 ng / ml Immunovac-PE-4 bila je optimalna za indukciju DK- dospijeva pod tim uvjetima razina ekspresije kostimulacijskih molekula bila veća. Međutim, ekspresija F4 / 80 molekula na DC stimulirane Immunovac-VP-4 i lizat K. pneumoniae, ostao povišen (23,8 ± 2,6% i 21,2 ± 3,4%, odnosno) u odnosu na DC, pomiješa se s TNF-a (0,6 ± 0,2%).

Također je istražena imunofenotip dendritičkih stanica koje, dobivene iz stanica koštane srži miševa. Kao induktori sazrijevanja koristi imunomodulatora bakterijskog porijekla - Immunovac-VP-4 GMDP, ASO, a kao upravljačke - lizata LPS i K. pneumoniae, i TNF-a.

Aktivacija stanica preko Immunovac-VI-4 GMDP i dovodi do sazrijevanja stanica. Povećava ekspresiju kostimulacijske molekule, adhezijske molekule CD38. Tako koncentracije korištene Immunovac-PE-4 imali različite učinke na razini MHC. U dozi od 25 ug / ml MHC I ekspresije sam 2,7 puta veća nego u koncentraciji od 50 ug / ml. MHC II izraz bio visoko na obje doze i nije imao značajne razlike. GMDP povećan sadržaj DC izražavanje MHC klase II.

korištenje Lizat K. pneumoniae i LPS poboljšane razine ekspresije kostimulatorne molekule MHC molekula koji predstavljaju antigenu I i II.

Kada koristite ACO kao induktora DC ekspresije marker CD34 sazrijevanja je doživjela značajne promjene kao funkcija doze. Njegova dinamika promatrati samo na najvišim dozama. U primjeni ARF u dozi od 0.3 EU / ml povećani CD80, CD86 sadržaj MHC I-ekspresijske stanice. Međutim, razina CD86 bio manji nego kod drugih induktora sazrijevanja. Izraz markera F4 / 80 u DC stimulirane Immunovac-VI-4 može biti povezana s prisutnosti bakterijskih LPS u vakcini. Ovi rezultati potvrđuju sposobnost DC dobivenih prethodno tretirani s LPS, brzih antigeni ne samo zrele DC, ali i receptori za LPS.

sljedeće pokusi ispitana je ekspresija tih markera u kombinaciji immmunomodulyatorov mikrobiološkog porijekla (IMMP) sa TNF-a. Uzgoj DC u prisutnosti GM-CSF i IL-4 s dodatkom na šesti dan 2,5 ng / ml TNF-a i IMMP DC sazrijevanja stimulirano u većoj mjeri nego doza TNF-a, i smanjenje održavanje u kulturi makrofaga. Po sebi, TNF-a u koncentraciji od 2,5 ng / ml (grupa 3) ne izaziva DC sazrijevanja u usporedbi s kontrolom (skupina 2), CD34 nezreli marker je 5 puta veći, F4 / 80 - 11,4 puta to upućuje na to da postoji značajan interes u kulturi makrofaga. Međutim, kada se koinkubatsii 2,5 ng / ml TNF-a ekspresija se pojavljivali s imunomodulatori povećanje CD38 adhesion molecule, kostimulatorne molekule CD40, CD80, CD86 i MHC I i II razred.

posebno ovo se odnosi na ASO, koinkubatsiya jer s TNF-a stimulirane izražavanja površinskih markera specifičnih za DC. To smanjuje markera CD34 u usporedbi s nezrelim DC (skupina 1) do 3,4 puta, povećanom ekspresijom adhezijskih molekula CD38 3,2 puta, kostimulatorne molekule CD40 38 puta, CD80 i CD86 gotovo 9 puta, MHC I 2 7 i MHC II 1,5 puta, razina makrofaga markera smanjen za 3.6 puta. Nakon ulaska u kulturi, medij za TNF-a i Immunovac-VI-4 je također pronađeno stimulacije efekta, ekspresiju koja značajno povećava ekspresiju MHC I i II i smanjenom sadržaj F4 / 80 u usporedbi s djelovanjem Immunovac-VI-4 u istoj dozi (Tablica, 7). Slični rezultati dobiveni su s kombinacijom TNF-a (2,5 ng / ml) i GMDP, ali je ekspresija CD40, CD80, CD86 i MHC II bio je veći u slučaju kombinacije TNF-a i Immunovac-VP-4.
nalazi predstava, da je uvod u mediju za uzgoj mala količina TNF-a pojačava potencijal DC sazrijevanja pod utjecajem imunomodulatori mikrobiološkog porijekla.